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如何改進(jìn)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中的錯(cuò)誤?

更新時(shí)間:2020-07-13   點(diǎn)擊次數(shù):1268次
   操作錯(cuò)誤意味著實(shí)驗(yàn)很有可能就前功盡棄,所以新手操作時(shí)一定要了解清楚每一個(gè)步驟,充分了解那些容易造成錯(cuò)誤的細(xì)節(jié)。為了更好的進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn),下面給大家介紹一下如何改進(jìn)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中的錯(cuò)誤。
  1、為了評(píng)價(jià)試劑的實(shí)用性,試劑的穩(wěn)定性對(duì)準(zhǔn)確度非常重要。使用ELISA試劑盒前,應(yīng)反復(fù)檢測(cè)陰性和陽性對(duì)照品及樣品。試劑符合要求后方可使用。
  2、實(shí)驗(yàn)前仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說明書。嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行規(guī)范操作。不同批次的試劑不混合。值得改進(jìn)的是,只有通過反復(fù)的測(cè)試,才清楚那個(gè)地方真的需要改進(jìn)和完善。
  3、樣品添加的準(zhǔn)確性和酶用量的不確定性直接影響顯色效果。另外,顯色深度和顯色值的確定與顯色劑和液體的加入量有關(guān),所以樣品的裝載要慎重。ELISA試劑盒需要在一定時(shí)間內(nèi)完成取樣檢測(cè)。如果采樣速度慢,就會(huì)出現(xiàn)誤差,試劑會(huì)長(zhǎng)期暴露,特別是當(dāng)室溫過高時(shí),保質(zhì)期會(huì)縮短甚至失效。
  4、檢驗(yàn)技術(shù)人員應(yīng)具備實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。檢測(cè)技術(shù)人員能熟練操作檢測(cè)儀器,具有一定的總結(jié)分析問題的能力,能及時(shí)、妥善地解決ELISA試劑盒檢測(cè)中出現(xiàn)的意外情況。
  5、沒有清洗干凈酶偶聯(lián)物的背景色為假陽性。此外,清潔劑應(yīng)該是新鮮的,能夠隨時(shí)使用。舊的洗刷劑會(huì)添加布景,也可能呈現(xiàn)假陽性。
  6、嚴(yán)格控制ELISA試劑盒檢測(cè)的反應(yīng)時(shí)間。ELISA試劑盒反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng),酶失活,反應(yīng)時(shí)間過短,酶與血清中微生物抗原和抗體不能*結(jié)合,產(chǎn)品結(jié)構(gòu)松散不穩(wěn)定,易清洗,易產(chǎn)生假陰性。