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進(jìn)口elisa試劑盒測(cè)定結(jié)果錯(cuò)誤的原因

更新時(shí)間:2018-03-22   點(diǎn)擊次數(shù):1397次
現(xiàn)對(duì)進(jìn)口elisa試劑盒在使用過(guò)程中出現(xiàn)的一些問(wèn)題談一點(diǎn)自己的見(jiàn)解
1、引起進(jìn)口elisa試劑盒測(cè)定結(jié)果錯(cuò)誤的主要因素分析
A、樣品因素
a、樣品的內(nèi)源性因素 樣品的內(nèi)源性因素包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等。這類(lèi)因子在ELISA測(cè)定中,可與固相載體上包被的特異性抗體或抗原結(jié)合,從而出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。用 ELISA試劑盒檢測(cè)樣品時(shí)應(yīng)當(dāng)使用的樣品稀釋液稀釋樣品,以減少非特異性反應(yīng)。
b、樣品的外源性因素 外源性干擾因素包括樣品溶血、樣品被細(xì)菌污染、樣品保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)和樣品凝固不全等。溶血的血清樣品中所含鐵血紅素有類(lèi)似過(guò)氧化物酶的活性,因此在以辣根過(guò)氧化物酶(HRP)為標(biāo)志的ELISA測(cè)定中, 如果血清樣本中的血紅蛋白濃度較高,則很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相載體上,從而催化HRP底物發(fā)生顯色反應(yīng)。所以在采血和分離血清時(shí),應(yīng)注意防范。
B、試劑因素
試劑盒在出售前都要經(jīng)過(guò)質(zhì)量檢驗(yàn),一般來(lái)說(shuō)試劑不會(huì)出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題。但值得注意的是,不可使用過(guò)期的試劑和混用不同批號(hào)的試劑,如發(fā)現(xiàn)試劑顏色不正常。應(yīng)停止使用。
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